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DNA合成样品要求
1.本核苷酸是以OD260单位来计量的。1 OD260值系指在1 ml体积1 cm光程标准比色皿中,于26
0 nm波长下的吸光度为1 A260 。由此,1 OD260 值相当于33µg的核苷酸,客户可根据此数据
和核苷酸的分子量得到摩尔数以计算溶液浓度。
2.本公司提供的序列报告为美国PE公司3948或3900型DNA合成仪在合成时打印的,核苷酸分子
量计算公式如下:
MW=(A碱基数x312)+(C碱基数x288)+(G碱基数x328)+(T碱基数x303)- 61
例:序列组成为AGCTGCTACTGGCCACGT, OD260值为4,加500 µl消毒双蒸水溶解:
A = 3 C = 6 G = 5 T = 4
分子量 =(3x312)+(6x288)+(5x328)+(4x303)- 61 = 5455
质量数 = 4x33 = 132 mµg
摩尔数 = 132/5455 = 0.024 µmol
浓度 = 0.024 µmol/500 µl = 48 µM
3.3900型DNA合成仪所合成的核苷酸经聚丙烯酰胺凝胶电泳纯化及脱盐后,呈干膜状粘附在试管 壁上;3948型DNA全自动合成仪自身携带OPC纯化系统,产品抽干之后呈白色干粉状沉积于试管壁 上,为正常的外观现象。两种纯化方式所得到的核苷酸产品,其纯度与质量均达到PCR与DNA测序 反应用之要求。核苷酸打开时极易散失,所以开试管前应先离心,然后小心打开管盖。
4.加入1 ml消毒双蒸水,即可得到3948型DNA合成仪报告所标示的pmol/µl浓度。配液时请充分 振荡5-10分钟。客户如需配制其它浓度,请在配液时按上述方法进行计算。
5.如对核苷酸进电泳分析,请用含7 M尿素的聚丙烯酰胺凝胶电泳和1倍TBE缓冲液,切不可使用 琼酯糖电泳。为了防止加样时的扩散和二级结构影响,上样前必须用饱和尿素处理。
6.本核苷酸的5'和3'端均为羟基,若需加连磷酸基团,则要另外处理,本公司有此合成业务。
7.本核苷酸应在-20oC以下保存。本核苷酸的TE或水溶液可在-20oC保存一个月;若为干粉状,
可在-20oC保存6个月;在-70oC条件下几乎可长期保存。
8.责任条款:(请客户仔细阅读)
a.因为PCR反应所涉及的条件和因素众多复杂,所以PCR实验不成功,不能成为要求我司重新合
成PCR引物或要求退款的主要依据。DNA测序样品要求上海基康生物技术有限公司目前在中国市
场主要有DNA测序和DNA合成的服务业务。关于测序我们可以接收菌株PCR产物等样品进行测序。 b.应客户要求,由我司代为免费设计的PCR引物,经客户检验确认之后,再进行合成,因此我司 不承担任何设计责任。
浓度: 基因组DNA 20-50ng/ul(其他形式样品请保证相应浓度)量: 2-3ul/位点质量:能
c.质量保证:基康公司合成的核苷酸在贵实验室的正常条件下使用时,如发现存在质量问题或相 关疑问,请在规定的期限(一个月)内与我司联系,以免延误您的实验进程,同时 便于我们根据
您提供的信息进行核查。
我们的责任及客户的唯一索赔方法是在上述期限内与我司联系,并经确认后替换产品或全额退
款。除此之外,本公司不提供或暗示其他任何保证,对任何因此而造成的后续性损失概不负责。
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